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實驗室

實驗室建設規劃-PCR實驗室設計施工

文字:[大][中][小] 手機頁麵二維碼 2017/12/14     瀏覽次數:    
PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術,用於放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA複製。通過DNA基因追蹤係統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其精確度高達納米級別。PCR實驗室必須建立嚴格的實驗室管理製度、建立標準化操作程序(SOP)、建立係列質量管理文件等,確保實驗室日常運行符合國家衛生部的要求,確保檢測結果準確、確保實驗室衛生安全,確保實驗室長期穩定運行。PCR擴增檢驗實驗室原則上分為三個單獨的工作區域:試劑貯存和準備區、標本製備區、擴增和擴增產物分析區。為避免交叉汙染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即隻能從試劑貯存和準備區→標本製備區→擴增和擴增產物分析區。各實驗區之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。

(1)試劑貯存和準備區

該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的製備、試劑的分裝和主反應混合液的製備。試劑和用於樣品製作的材料應直接運送至該區,不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內,並在本區內製備成所需的貯存試劑。對與氣流壓力的控製,本區應對外界保持微正壓。



(2)標本製備區
該區域主要進行的操作為樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區的壓力梯度要求為:相對於鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠汙染。另外,由於在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的汙染,所以應避免在本區內不必要的走動。
(3-4)擴增和擴增產物分析區
該區域主要進行的操作為DNA擴增和擴增片段的測定。此外,已製備的DNA模板(來自樣本製備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和製備區)製備成反應混合液等也可在本區內進行。本區的壓力梯度要求為:相對於鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的汙染,應盡量減少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超淨台內進行。

 PCR區完成以後,需要分析樣品並解釋數據,應該留出一個專門用於反應後處理樣品的地方。後PCR活動中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用於這一目的,決不能把實驗室這一區域的試劑或儀器用於任何前PCR活動。產物分析區如使用全自動分析儀,區域可適當合並。

(5)緩衝區與衝洗區
整個區域有一個整體緩衝走廊。每個獨立實驗區設置有緩衝區,同時各區通過氣壓調節,使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的汙染並降低擴增產物對人員和環境的汙染。
可打開緩衝區Ⅰ,緩衝區Ⅱ和 PCR 擴增區的排風扇往外排氣,在實驗區的外牆上和各扇門上都安裝有風量可調的回風口,空氣通過回風口向室內換氣。外麵有用於實驗後消毒,消毒區域有專用清洗液和專用潔淨洗手池,以及消毒紙巾。

若房間進深允許,可設PCR內部專用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方麵,緩衝間比專用走廊更有意義。各個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互幹擾,防止核酸氣溶膠對實驗過程造成汙染產生假性結果。 

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